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產品詳細頁
產品介紹
Ludger 聚糖釋放試劑盒(Glycan Release Kits)的應用：
For release of glycans from glycoprotein therapeutics
糖蛋白中釋放聚糖
聚糖釋放試劑盒（Ludger Glycan Release Kits）有三種：
一、N-和O-聚糖釋放試劑盒
LudgerLiberateTM Hydrazinolysis Glycan Release Kit for N- and O-Glycan Release
(Cat# LL-HYDRAZ-A2)
For release of N + O-linked glycans from glycoprotein therapeutics.
1. 應用：糖蛋白釋放N-和O-聚糖
2. 檢測樣本數量：12個糖蛋白樣本
3. 樣本量：1mg以上
4. 樣本：Biopharmaceutical glycoproteins 糖蛋白
5. 運輸及保存：常溫運輸，4度保存，避光，可保存18個月
6. 試劑盒成分：
Cat. # | Item | Quantity |
LL-HYDRAZINE-01 | Hydrazinolysis Release Reagent 酰肼釋放試劑 | 2 x 3ml |
LL-BICARB-01 | Solid sodium bicarbonate 固態碳酸氫鈉 | 2 x 0.33 g |
LL-OCTANOL-01 | Octanol 正辛醇 | 2 x 0.2 ml |
LL-ACETANHYD-01 | Acetic anhydride 醋酸酐 | 2 x 0.5 ml |
LL-TFA-5PC-01 | TFA solution trifluoroacetic acid溶液 | 2 x 4 ml |
LC-EB20-01 | LudgerClean? EB20 cartridges LudgerClean? EB20色譜柱 | 2 x 6 cartridges |
LC-EB20-WASHA-01 | EB20 Wash A Solution EB20 洗脫試劑A | 2 x 12 ml |
LC-EB20-WASHB-01 | EB20 Wash B Solution EB20 洗脫試劑B | 2 x 12 ml |
LC-CEX-H-01 | LudgerClean? CEX cartridges LudgerClean? CEX色譜柱 | 2 x 6 cartridges |
LL-WASTEV-01 | Wash waste vials 洗滌管 | 2 x 6 vials |
LL-REACT-01 | Glass reaction vials with PTFE lined caps 帶聚四氟乙烯蓋玻璃反應管 | 2 x 6 vials |
LL-COLLV-01 | Glass collection vials with PTFE lined caps 帶聚四氟乙烯蓋玻璃采集管 | 2 x 6 vials |
N-和O-聚糖釋放試劑盒使用操作步驟：
1. 樣品準備：準備糖蛋白或糖肽樣本，需先去除干擾多肽釋放的污染物，如鹽、洗滌劑、染料等，獲得比較純的糖蛋白
2. 干燥樣本：將樣本放置在反應管中，冷凍干燥或離心蒸發至*干燥
3. 加肼試劑：將肼試劑加入反應管中，蓋上蓋漩渦混勻
4. 孵育：孵育樣本，讓聚糖釋放。
O-Mode Hydrazinolysis： Incubate 6 hours at 60℃
N-Mode Hydrazinolysis (Fast)： Incubate 5 hours at 100℃
N-Mode Hydrazinolysis (Normal)： Incubate 16 hours at 85℃
N+O Mode Hydrazinolysis ： Incubate 16 hours at 60℃
5. 冷卻樣本至室溫
6. 離心蒸發去除多余的酰肼
7. 乙酰化作用：加醋酸酐乙酰化游離的氨基，得到β-乙酸肼（根據糖苷類型N-Glycans，O-Glycans或N+O-Glycans，操作方式有差別，詳見說明）
8. 酸化和純化游離的聚糖根據糖苷類型N-Glycans，O-Glycans或N+O-Glycans，操作方式有差別，詳見說明）：
1）N-聚糖：用EB20聚糖純化柱(Cat # LC-EB20-01)
2）O-聚糖或N+O-聚糖：用CEX聚糖純化柱(Cat# LC- CEX-H-01)
9. 保存或分析釋放的聚糖：可直接分析或熒光標記分析
二、N-聚糖釋放試劑盒
Ludger Liberate MR(Membrane Release) Glycan Release Kit（Cas# LL-MR-A2）
For immobilizing, clean up and PNGaseF mediated release of glycans from glycoproteins
應用：固定、清除和PNGaseF（肽 N-糖苷酶F）介導釋放糖蛋白中的N-聚糖。固定糖蛋白可以去除干擾聚糖分析的低分子量溶劑/緩沖組分，例如海藻糖。
PNGase F幾乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有N-連聚糖（x=H或寡糖）
肽 N- 糖苷酶 F，即 PNGase F，是一種酰氨酶，可以在 N- 連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復合寡糖部分zui內側的 N- 乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間進行切割
樣品數：96孔板，適用于檢測96個樣本
樣本及樣品量：樣本為糖蛋白，每孔>100ug糖蛋白，具體根據樣本來定
儲存及運輸：試劑盒中成分依據說明書儲存，常溫運輸
三、O-聚糖快速釋放試劑盒
Ludger Liberate Orela O-Glycan Release Kit （Cas# LL-ORELA-A2）
For release of O-linked glycans from glycoprotein therapeutics.
應用：用于釋放糖蛋白中的O-聚糖，釋放的聚糖有游離的末端，通過還原胺化反應可以做熒光標記進行檢測。
樣品數：可檢測12個糖蛋白樣本
樣品及樣本量：Biopharmaceutical glycoproteins 生物制藥糖蛋白，每個樣本的量>1mg
儲存及運輸：試劑盒中成分依據說明書儲存，常溫運輸
聚糖釋放試劑盒（Ludger Glycan Release Kits）,Ludger糖基化分析和檢測步驟圖如下，可根據下圖來選擇Ludger產品：
